四唑染色法测定巨紫荆种子生活力(2)

　　2结果与分析
　　2.1TTC浓度、染色温度和染色时间对种子生活力的影响
　　采用四唑染色法测定巨紫荆种子生活力的正交试验 L9（33） 试验结果见表2。巨紫荆种子生活力最高（99.33%）的处理组合为0.15%TTC浓度、35 ℃染色温度、8 h染色时间（处理组合6），以及0.20% TTC浓度、35 ℃染色温度、12 h染色时间（处理组合9）；生活力最低（0.67%）的处理组合为0.10% TTC浓度、25 ℃染色温度、8 h染色时间（处理组合1），低于最高生活力98.66%。
　　将所得数据进行方差分析，结果见表3。染色温度以及染色时间的F值（53.72、20.78）均远大于F0.01（3.92），表现差异极显著；TTC浓度的F值（1.63） 小于F0.01，差异不显著。3个因素对巨紫荆种子生活力的影响大小排序为温度>时间>TTC 浓度。
　　各因素不同水平的种子生活力平均值比较结果见表4。随着TTC浓度升高，种子的活力呈现先上升后下降的趋势，但是其变化幅度不大，从节省原料的角度出发，可以考虑选择低浓度的TTC；染色温度越高，巨紫荆种子的活力越高，当温度为35 ℃时，巨紫荆种子的活力达到98.66%，而且随着温度升高，差异显著，35 ℃条件下巨紫荆种子的活力比30 ℃条件下提高了38.88%；随着染色时间延长，种子活力也上升，表现差异显著，但相对于温度来说，其影响程度还是很小。综上所述，结合节约资源、减少污染的实际情况，TTC 法测定巨紫荆种子生活力的最佳条件为0.10% TTC浓度溶液，在 35 ℃ 烘箱中染色8 h。
　　表2TTC染色法正交试验结果
　　处理组合因素ABC种子活力
　　（%）11110.67212261.33313397.3342122.00 522397.33623199.33731364.67832120.67933299.33
　　表3TTC浓度、温度、浸种时间处理的巨紫荆种子
　　生活力测定方差分析
　　来源dfSSMSF值F0.01因素A2198.7499.371.633.92因素B26536.973268.4853.72因素C22528.071264.0420.78误差271642.5460.84
　　2.2TTC浓度与染色时间的关系
　　不同浓度TTC液（0.3%、0.4%、0.5%）对种子染色数目、染色时间及染色程度的比较试验结果见表5。
　　表4不同水平的巨紫荆种子生活力平均值比较
　　水平种子生活力平均值（%）TTC浓度染色温度染色时间153.11c22.45c40.22c266.22a59.78b54.22b361.56b98.66a86.44a注：同列中不同小写字母表示在P<0.05水平上表现差异显著。
　　表5不同浓度TTC液的染色情况
　　TTC浓度
　　（%）试验种子数
　　（粒）染色种子数
　　（粒）着色稳定时间
　　（h）0.3504960.4505040.550494
　　结合TTC浓度试验结果，可以看出只要染色温度适宜，TTC浓度对巨紫荆种子活力的影响不大，不论浓度高或低，均能染色；TTC浓度高时，可以缩短染色时间。出于节约试剂、减小污染的目的，在试验时尽可能选择较低浓度染色。根据上述结果，TTC 法测定巨紫荆种子生活力的最佳条件与正交试验结果一致。
　　2.3种子发芽率与种子生活力的关系
　　试验进行30 d 后种子均未见萌发，继续观察1个月后，仅有个别种子开始出现霉烂现象，但是仍然没有萌发迹象。此时每个处理随机抽取 50 粒种子，用四唑染色法测定其种子的生活力。由表 6 可知，绝大多数成熟的巨紫荆种子具有良好的生命活力；在进行发芽试验时，适当的处理方法对种子之间生活力影响不大。
　　表6巨紫荆种子生活力测定结果
　　处理有生活力种
　　子数（粒）无生活力种
　　子数（粒）发芽种子数
　　（粒）发霉种子数
　　（粒）1482002491003455004462025431246473007500008473009454011042404